癌症是伴侣动物（如犬和猫）疾病相关死亡的首要原因。尽管诊断与治疗手段不断进步，但整体疗效仍未取得显著改善。近年来，一种新兴的疗法——溶瘤病毒（Oncolytic Viruses, OVs）治疗，正在宠物肿瘤治疗领域展现出巨大潜力。溶瘤病毒能够选择性地感染并裂解癌细胞，同时激发抗肿瘤免疫应答，而对健康组织损伤较小。
早在2006年，《Cancer Biotherapy and Radiopharmaceuticals》期刊上就发表了一篇有关犬用溶瘤病毒体内实验研究的文章《Administration of a Conditionally Replicative Oncolytic Canine Adenovirus in Normal Dogs》。
骨肉瘤是犬类最常见的原发性骨肿瘤。约75%为肢体末端肿瘤，常见于大型和巨型犬。犬骨肉瘤的病因目前尚未明确。然而，其发病机制被认为与多种细胞周期及生长因子相关基因（如p53、RB、IGF-1和IGF-1R等）及其蛋白产物的遗传调控异常密切相关。
转移极为常见，最常发生的转移部位为肺部。若不进行干预，患病动物的中位生存时间为6个月或更短，死亡通常归因于转移性疾病。治疗方式包括姑息性截肢或保肢手术联合化疗，但化疗仅能将中位生存期延长约6-8个月。
图1.目前对于患有骨肉瘤的宠物犬，截肢是避免肿瘤恶化的治疗选择之一
图片来源：qingfengwanm20
研究团队基于犬腺病毒2型（CAV-2），开发了一种"同源"（syngeneic）条件复制性腺病毒（CRAd），通过转录水平靶向改造使其特异性作用于犬骨肉瘤（Osteosarcoma, OS）细胞。同时，研究者系统性评估了骨肉瘤靶向CAV-2 CRAd在健康犬只体内给药的效果与安全性。
在实验中，6只2-3岁混种实验犬接受病毒注射，并在BSL-2级设施中进行隔离饲养。所有犬均按规范接种多联疫苗（其中包括CAV-2源性肝炎疫苗，可交叉免疫CAV-1）。实验前检测CAV-2抗体基线，其中3只犬（1-I、2-I、3-I）在病毒注射前3天起口服环磷酰胺（50 mg/m²/日）进行免疫抑制，而犬只1、2和3则保持正常免疫功能。所有样本采用标准临床方法检测，CAV-2滴度通过血清中和试验评估，以细胞病变效应为判定标准（图2）。
图2.血清中和试验检测6只实验犬在接受CAV-2源性条件复制性腺病毒（CAV-2-based Conditionally Replicative Adenovirus, CRAd）注射前后的抗体水平变化
通过每日PCR对全血、血浆、尿液和粪便样本进行病毒定量检测，结果显示：犬1-I粪便24小时呈低拷贝数阳性（2.8拷贝/克），犬2粪便72小时拷贝数升高至59.8拷贝/克，犬3和3-I尿液分别检出51拷贝/微升（24小时）和22拷贝/微升（96小时）。血浆与全血样本（图3）中病毒DNA持续存在48小时以上，部分可持续至96小时，但免疫抑制组与正常组间病毒浓度无统计学显著差异。
图3.血浆中犬腺病毒2型（CAV-2）源性条件复制性腺病毒（CRAd）定量分析
尸检组织qPCR分析（图4）显示脾脏病毒载量最高（5/6例），肝脏次之（2/6例），其中犬3-I因DNA回收量低可能存在人为偏差；肺组织（犬2、2-I）呈低水平阳性，其余心、肾、脑等组织仅检出微量病毒DNA。
图4.组织中CAV-2源性条件复制性腺病毒（CRAd）定量结果
这项短期研究在健康犬中评估了CAV-2源性条件复制腺病毒（CRAd）的初步安全性，结果显示未出现任何明显毒性症状。血液循环中CRAd DNA的存在至少持续48小时，提示病毒在体内具有良好的稳定性，为其靶向感染播散性肿瘤提供了可能。未来还可开展长期研究，以评估潜在的长期影响，如骨重塑或组织修复的变化。
目前的研究结果对CRAd在犬癌症治疗中的应用具有重要启示：短期免疫抑制并未增加不良事件风险，同时理论上为循环病毒提供了更多时间去感染、复制并扩散到肿瘤组织，为溶瘤病毒药物研发提供了可靠依据，也为未来动物肿瘤治疗策略的优化奠定了基础。
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服务内容：
服务案例：
图5. 以NDV为载体的改造溶瘤病毒候选株（NDV-OV1,NDV-OV2,NDV-OV3）给药后，成瘤小鼠肿瘤体积变化。A:LLC成瘤小鼠；B:B16F10成瘤小鼠。
图6. 以VSV为载体的改造溶瘤病毒候选株(VSV-OV1)给药后，成瘤小鼠肿瘤体积变化。A:LLC成瘤小鼠；B:B16F10成瘤小鼠。
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参考文献：
Zhao X, Li W, Sun Y, Ma J. Oncolytic senecavirus A in tumor immunotherapy: Mechanisms, progress, and future directions. Virology. 2025 Feb;603:110338.
Smith BF, Curiel DT, Ternovoi VV, et al. Administration of a conditionally replicative oncolytic canine adenovirus in normal dogs. Cancer Biother Radiopharm. 2006 Dec;21(6):601-6.
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